声学传动快速培养基交换和连续流电转染原代人类T细胞，应用于自动化细胞治疗制造

        基于改造T细胞表达嵌合抗原受体基因的自身细胞疗法在治疗血液癌症方面取得了高度成功。这些疗法的应用受限于其制造的复杂性和成本。将这些工艺从基于病毒的基因递送方法转变为非病毒方法（如电穿孔），有望大幅降低成本和制造时间，同时提高安全性和有效性。电穿孔的主要挑战是暴露于高强度电场对细胞健康的负面影响，以及大多数商业散装电孔器是为手动操作、低通量批量处理细胞设计的低精度仪器。通过使用专用电穿孔培养基可以减轻对细胞健康的负面影响，但这会增加处理步骤，长期暴露于这些培养基会降低转染效率和转染后存活率。为了实现利用电转染在专用培养基中实现细胞治疗的自动化临床规模生产，我们开发了一种高精度微流控平台，能够通过声波传导自动且持续地将细胞从培养基转移到电穿孔培养基，并立即从集成电极施加电场。这将细胞在电穿孔培养基中的停留时间限制在几秒钟内，并实现了高转染效率，同时对细胞存活率的影响最小。我们通过将标准细胞培养基中的原发人类T细胞转移到电穿孔培养基，然后用编码mCherry荧光蛋白的mRNA转染来测试我们的系统。我们实现了培养基交换效率86%，转染效率高达60%，存活率降低率不到5%。

        原标题：Acoustophoretic rapid media exchange and continuous-flow electrotransfection of primary human T cells for applications in automated cellular therapy manufacturing

        通讯作者：Tandon, Vishal

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